PROJET DE RECHERCHE 2022
PROJET DELIGHT
PROJET DELIGHT
Publication du 29/09/2023
État des lieux du projet DELIGHT
au 27 février 2023
Étude de l’influence des traitements de désimmunisation sur la réponse immunitaire de patients hyperimmunisés en attente de transplantation rénale
1- Cohorte déjà établie :
Les cellules des 40 patients désimmunisés au CHU de Grenoble-Alpes : recensement des PBMC (cellules mononuclées du sang )congelés : exploitables pour 26 patients : avec en moyenne 2 aliquots de cellules x 5 pour chaque patient à différents temps du suivi
Analyses fonctionnelles en ELISPot (enzyme-linked immunospot) :
technique immunoenzymatique permettant de dénombrer des cellules à partir de leur sécrétion
Étapes de mise en place de la technique ELISPOT B anti-HLA (anticorps ciblant les cellules des donneurs d’organes, HLA : human leukocyte antigen)
Mise en place de la technique « classique » ELISPOT T : validée avec peptide anti BK virus (BKV) témoin positif (T+) et témoin négatif (T-). Cf Figure 1
Mise en place ELISpot B anti BKV et anti HLA : réactifs reçus. Début des expériences en mars sur témoin sain puis patients transplantés puis sur la cohorte de patients désimmunisés (objectif mai 2023)
Analyses en cytométrie de flux :
élaboration et validation du panel des anticorps pour cibler les cellules sécrétrices d’anticorps (ASC pour antibody secreting cells) cf. Figure 2
Commande des réactifs en cours : début des expériences de mise au point en mars 2023 d’abord sur témoin sains puis sur patients transplantés rénaux puis sur la cohorte de patients désimmunisés (objectif mai 2023)
2- Cohorte prospective :
Projet DELIGHT prospectif avec analyses échantillon sanguin, médullaires et ganglionnaire de patients hyperimmunisés :
- Dépôt du dossier au CPP le 13 /12 / 2022
- Demande de compléments de la part du CPP le 11/01/2022 : réponse le 19/01/2022
- Au 27/02/2023 : en attente avis favorable
Fait à Grenoble, le 27 février 2023
Dr. Johan NOBLE
AVANCEMENT DU PROJET DE RECHERCHE DELIGHT (2022)
Étude de l’influence des traitements de désimmunisation sur la réponse immunitaire de patients hyperimmunisés en attente de transplantation rénale (étude DELIGHT)
État des lieux du projet DELIGHT au 29 septembre 2023
1- Analyses sur PBMC de 10 patients à 4 temps
avant désimmunisation, T1 le jour de la transplantation rénale, T2 à M3 post greffe et T4 à M12 post greffe
2- Analyse en cytométrie de flux :
Objectif : quantification de la population B-mémoire, Plasmablastes, B naifs et B transitionnels (Cf figure1) aux 4 temps pour chaque patient.
3- Analyses en ELISPot B anti-HLA, B anti BKV et T anti CMV, EBV et BK pour l’analyse de la réponse anti HLA et anti virale aux 4 temps pour chaque patient (40 tests)
4- Analyse métabolisme par méthode SCENITH (cf Figure 3)
Les étapes prévues du projet DELIGHT
Étape 1 (2023)
Dépôts du projet à la délégation de la recherche clinique et innovation (DRCI) pour accords du CPP et aide méthodologique
Étape 2 (2023 - 2024)
Récupération des échantillons, finalisation du RIPH prospectif et dépôt au CPP, explorations mécanistiques.
Étape 3 (2024 - 2026)
Réalisation des analyses de recherche à l’IAB (Institut for Advanced Biosciences) de Grenoble et publications des résultats.
